接触蛋白相关蛋白样2对垂体瘤细胞增殖与迁移侵袭的影响
王青松
夏鹰
海口市人民医院神经外科,海口 570208
摘要：目的 探讨接触蛋白相关蛋白样2(CNTNAP2)在垂体瘤细胞中的表达,及其对细胞增殖与迁移侵袭的影响,并阐明磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在其中的作用.方法 采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹(Western blot)检测小鼠垂体瘤细胞系中CNTNAP2的表达水平.在转染CNTNAP2过表达质粒(OE-CNTNAP2)和阴性对照质粒(OE-NC组)或CNTNAP2小干扰RNA序列(si-CNTNAP2)和阴性对照序列(si-NC)的垂体瘤GT 1-1细胞中,通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和Transwell实验检测细胞活力、凋亡情况以及迁移与侵袭能力;Western blot分析凋亡和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平及PI3K/Akt的磷酸化水平.利用PI3K/Akt通路激动剂740 Y-P处理细胞以探究该通路是否介导CNTNAP2的调控作用.结果 CNTNAP2在小鼠垂体瘤细胞中的表达显著低于正常垂体细胞.在OE-CNTNAP2组中,过表达CNTNAP2的细胞表现出以下显著的生物学变化:细胞增殖受到抑制(CCK-8检测显示细胞活力均下降);细胞凋亡增加(TUNEL阳性率升高,促凋亡蛋白Bax与活化型胱天蛋白酶-3表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调);细胞迁移与侵袭能力减弱(Transwell实验中穿膜细胞数减少);以及EMT进程受阻(上皮标志物E-钙黏蛋白表达上调,间质标志物N-钙黏蛋白表达下调).同时,该组细胞中PI3K/Akt信号通路活性被抑制,表现为PI3K与Akt的磷酸化水平降低.相反,在si-CNTNAP2组中,敲低CNTNAP2的细胞呈现相反的生物学表型,即增殖增强、凋亡减少、迁移侵袭能力提升以及EMT进程被促进,同时伴随PI3K/Akt信号通路激活.740 Y-P处理能够有效逆转CNTNAP2过表达所引起的细胞增殖抑制、凋亡增加、迁移侵袭能力下降以及PI3K/Akt通路磷酸化水平降低等效应.结论 CNTNAP2在垂体瘤细胞中发挥肿瘤抑制因子作用,其过表达通过抑制PI3K/Akt信号通路,进而阻遏细胞的增殖、迁移侵袭及EMT进程.
关键词：垂体瘤接触蛋白相关蛋白样2增殖迁移侵袭
论文发表日期：2026-01-28
在线出版日期：2026-03-18（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 9-15 )
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