不含佛波醇酯和霍乱毒素条件下黑素细胞的培养
李建军1
郑锦芬1
江智茂1
张芳婷2
钟绮丽1
马刚1
程滨珠1
1.北京大学深圳医院皮肤科,广东,深圳,5180362.北京大学深圳医院中心实验室,广东,深圳,518036
摘要:目的:建立不含佛波醇酯(TPA)和霍乱毒素(CT)培养液培养人类正常表皮黑素细胞的方法,避免TPA的致瘤危险和霍乱毒素的毒性.方法:临床环切包皮经中性酶-胰酶(DispaseⅡ-Trypsin)两步消化后,获得表皮基底细胞悬液,于不含TPA和CT的KC-SFM角质形成细胞无血清培养基培养,用差速贴壁法及胰酶差速消化法去除角质形成细胞,用两段法去除成纤维细胞污染,观察黑素细胞的增殖情况和树突伸展状态,采用多巴(Dopa)染色和免疫组化对黑素细胞进行鉴定.结果:经过7天的培养,黑素细胞达到70%汇合,细胞呈双极、三极或多极的树突状.经1-2次传代,黑素细胞纯度达98%以上,Dopa染色和抗S一100单抗染色阳性.结论:用不含TPA和CT的KC-SFM角质形成细胞培养基可以获得大量高纯度黑色素细胞.
关键词:皮肤黑素细胞细胞培养
分类号:R329.2+8(人体形态学)
资助基金:深圳市科技计划(200404090)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 336-339 )
英文信息
