梅毒螺旋体特异性抗原Tp0453及其截短蛋白的克隆、表达及活性检测
郑和平
覃晓琳
黄进梅
薛耀华
白顺
吕萍
杨斌
1.广东省皮肤病医院,广东 广州,5100912.广东省皮肤病医院,广东 广州,5100913.广东省皮肤病医院,广东 广州,5100914.广东省皮肤病医院,广东 广州,5100915.广东省皮肤病医院,广东 广州,5100916.广东省皮肤病医院,广东 广州,5100917.广东省皮肤病医院,广东 广州,510091
摘要：目的:克隆和鉴定梅毒螺旋体(Tp)特异性抗原Tp0453及其截短蛋白(Tp0453-s),并用梅毒患者血清检测抗原反应性.方法:PCR扩增Tp0453和Tp0453-s基因,分别构建重组表达质粒pGEX-6P1-Tp0453和pET-28a(+)-Tp0453-s,经测序鉴定正确后转染E.coli BL21 (DE3),对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定.用不同分期梅毒患者血清作为一抗,Western blot检测抗原反应性.结果:经鉴定,2个原核表达质粒均构建成功,SDS-PAGE电泳和Western blot结果显示2个蛋白大小与预期一致.Western blot检测显示2个蛋白均与梅毒患者血清特异性结合,而与非梅毒患者血清无交叉反应.结论:成功克隆、表达并纯化了Tp0453和Tp0453-s蛋白,2个蛋白均有良好的抗原反应性.
关键词：梅毒螺旋体外膜蛋白Tp0453Western blot
分类号：R759.1(性病学)
资助基金：广东省医学科研基金(A2010112)广东省科技计划项目(2011B031800225)广东省科技计划项目(2012B031800175)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 283-286 )
英文信息