麻风杆菌 PCR 检测方法的优化及应用
叶理
吕成志
靳亚丽
王会翔
张振国
宋顺鹏
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摘要：目的：研建一种适用于临床中检测麻风杆菌（ ML）的分子生物学方法，并优化检测条件以提高检测方法的灵敏度。方法：用麻风杆菌纯DNA作模板，对PCR反应体系中模板浓度、引物浓度等反应条件进行优化，以建立高敏感性的PCR反应体系，并与实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法比较，对麻风病人标本进行检测，确定优化后两法的反应体系及两法的临床检测意义。结果：经过大量的实验比对表明，反应体系引物含量为0.2μL ×100μmol时，模板浓度10－1条ML／mL可以作为稳定的可检测到条带的模板浓度的下限。对52例各型麻风患者标本的检测结果显示常规 PCR 检测阳性数（49／52）略高于Real-time PCR（47／52），但Real-time PCR操作程序简单和需时短，且成本低。结论：通过对PCR反应条件中DNA模板浓度和引物浓度的优选，提高了PCR检测麻风杆菌DNA的灵敏度；对于不同PCR方法的选择方面， Real-time PCR 比常规 PCR 简捷快速，而常规 PCR 灵敏度略高于 Real-time PCR。
关键词：麻风分枝杆菌聚合酶链反应实时定量聚合酶链反应
分类号：R755(皮肤病学与性病学)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 23-26 )
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