重组大肠杆菌pQE30-ChIL-6/JM109的遗传稳定性研究
王淑娟
崔沛
王东方
闫若潜
1.河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州,4500082.河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州,4500083.河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州,4500084.河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州,450008
摘要：为研究携带鸡白细胞介素-6(ChIL-6)基因的重组大肠杆菌pQE30-ChIL-6/JM109的遗传稳定性.本文通过菌株传代方法将重组菌株pQE30-ChIL-6/JM109在含有氨苄青霉素的LB液体培养基中连续传至100代,选取第1、10、20、50、100代菌株为研究对象,分别比较各代次菌株的菌落形态、细菌形态、质粒保有率、生长速度等差异;取各代次菌株提取质粒DNA且分别进行双酶切及PCR鉴定、DNA序列比对;诱导表达各代次菌株,比较其重组ChIL-6蛋白的表达水平及免疫反应性.结果表明,各代次菌株菌落形态、生长速度等方面无明显差异;在传至100代时的质粒保有率为89％;各代次菌株重组质粒电泳图谱、酶切图谱、PCR图谱均未改变,未见ChIL-6基因变异;各代次菌株的蛋白电泳图谱、ChIL-6蛋白表达量、ChIL-6蛋白的体外促鸡脾淋巴细胞增殖活性无明显差异.结果提示,重组大肠杆菌pQE30-ChIL-6/JM109具有较好的遗传稳定性.
关键词：鸡白细胞介素-6重组大肠杆菌遗传稳定性
分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1-7 )
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