牛副流感病毒3型SYBR Green Ⅰ Q-PCR方法的建立
闻晓波
张玲玲
张峣
冉旭华
1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆,1633192.黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆,1633193.黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆,1633194.黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆,163319
摘要：本研究建立了检测牛副流感病毒3型的SYBR Green Ⅰ Q-PCR方法.根据GenBank发表的BPIV3序列进行对比分析,选取P基因上保守区域设计特异性引物.优化反应体系,建立Q-PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行验证.结果显示,构建的标准曲线在104～ 108 copies.L-1内具有较好的线性关系,相关系数达到0.998,斜率为-3.370,Q-PCR扩增效率为98％.特异性试验中,利用该方法对BPIV3a及BPIV3c进行检测为阳性,对牛疱疹病毒Ⅰ型、牛病毒性腹泻病毒进行检测,结果呈阴性.敏感性试验中,该方法对标准品的最小检出量为1.0×103 copies.L-1.重复性试验中,Ct值变异系数均小于1.0％.表明SYBR Green Ⅰ Q-PCR法能够快速地对病原进行诊断,该方法具有较强的特异性、良好的敏感性及重复性,为实验室诊断及定量分析提供了更快速、稳定、可靠的方法.
关键词：SYBR Green ⅠQ-PCR牛副流感病毒3型检测
分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)
资助基金：黑龙江省农垦总局攻关课题(HNK125B-11-08A)黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目(YJSCX2016-Y27)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 8-14 )
英文信息