副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立及应用
梁乔
杨本勇
石霖
李井春
张健
赵凤菊
1.辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164;辽宁省动物医学研究院,辽宁 沈阳 1101642.辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164;辽宁省动物医学研究院,辽宁 沈阳 1101643.辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164;辽宁省动物医学研究院,辽宁 沈阳 1101644.辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164;辽宁省动物医学研究院,辽宁 沈阳 1101645.辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164;辽宁省动物医学研究院,辽宁 沈阳 1101646.辽宁省动物疫病预防控制中心,辽宁 沈阳 110164;辽宁省动物医学研究院,辽宁 沈阳 110164
摘要：为建立一种快速鉴别诊断副猪嗜血杆菌的方法,本试验针对副猪嗜血杆菌infB基因序列,利用Premier 5.0软件设计并合成了1对特异性引物,建立了针对副猪嗜血杆菌的PCR鉴别诊断方法,优化了退火温度,检测了该方法的敏感性和特异性,结果表明,本试验建立的PCR检测方法的最佳退火温度为49℃.敏感性试验表明,该PCR检测方法最低能检测到的DNA浓度为18.1×10-6μg/mL.通过特异性试验表明,本方法仅可由副猪嗜血杆菌中扩增出特异性条带,在金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等病原菌中扩增不出相应的条带,表明该方法具有较高的特异性.同时,通过对本方法检测出的阳性样品infB序列分析发现,与GenBenk中公布的副猪嗜血杆菌infB序列同源性均在98.2％～99％.表明建立的方法灵敏度高、特异性强,可以应用于副猪嗜血杆菌的实验室诊断.
关键词：副猪嗜血杆菌聚合酶链反应建立
分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 10-13 )
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