牛病毒性腹泻病毒SYBR Green荧光定量PCR方法的建立及其应用
刘存
崔尚金
1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193;农业部兽用药物与诊断技术北京科学观测实验站,北京 1001932.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193;农业部兽用药物与诊断技术北京科学观测实验站,北京 100193
摘要：为了建立BVDV快速诊断方法,针对BVDV基因组5'UTR序列保守区域设计了荧光定量PCR引物,并建立了快速检测BVDV的荧光定量PCR方法.结果表明,以构建的重组质粒pMD-5'UTR为标准品建立的SYBR Green荧光定量PCR方法标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9973;敏感性试验结果显示,该方法敏感性较好,其最低检测下限为10拷贝.重复性试验结果显示,该方法批内和批间的变异系数为均小于5％,表明该方法的重复性良好.特异性试验显示,该方法与牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒不存在交叉反应,但其不可区别鉴定BVDV与猪瘟病毒.应用所建立的SYBR Green荧光定量PCR方法测定非致细胞病变型BVDV(BVDV-BJ-2016株)分离毒株的一步生长曲线,发现在感染后12～48 h为其对数生长期.该研究为研究非致细胞病变型生长特性提供了参考.
关键词：牛病毒性腹泻病毒荧光定量PCR方法检测方法
分类号：S852.695.5(动物医学（兽医学）)
资助基金：农业科技创新工程项目(ASTIP-IAS15)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 9-13 )
英文信息