ANXA2真核表达载体的构建
刘容秀
凌莹
喜琴琴
李琼毅
1.西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,7300302.西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,7300303.西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,7300304.西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,730030
摘要：以膜联蛋白A2(Annexin A2,ANXA2)真核表达载体的构建过程为基础,介绍一种易于成功构建真核表达载体的方法.以Hela细胞来源的cDNA为模板,半套式PCR为基础,通过两次PCR的方法,可获得5'端添加Kozak序列并融合表达HA标签基因和ANXA2的基因片段Kozak-HA-ANXA2,回收后克隆到pMD-18T克隆载体,获得合适的酶切位点,再采用双粘端连接法将其克隆入慢病毒真核表达载体pTRIP中.结果显示,经双酶切和测序之后确定真核重组载体pTRIP-HA-humANXA2构建成功.通过半套式PCR方法构建真核表达载体成功率高,为下一步细胞表达试验创造条件.
关键词：真核表达载体载体构建膜联蛋白A2
分类号：R346(基础医学)
资助基金：国家级大学生创新创业训练计划项目(201910742092)创新项目(Y18071)国家自然科学基金(31702234)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 17-21 )
英文信息