牛冠状病毒NS 32蛋白的原核表达及免疫原性分析
王苗
杜万年
田占云
于秀剑
刘勃兴
吴同垒
史秋梅
张志强
1.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 0660042.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 0660043.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 0660044.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 0660045.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 0660046.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 0660047.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 0660048.河北科技师范学院,河北 秦皇岛 066004
摘要:试验为了研究牛冠状病毒NS32蛋白的免疫原性,以NS32作为研究对象,通过原核表达分析其抗原性.首先,从牛冠状病毒基因组中克隆出NS32编码基因,进一步将其克隆到原核表达载体上;其次,通过纯化重组的His-NS32蛋白进一步免疫小鼠,测定其特异性抗体水平评估NS32蛋白免疫原性.本试验成功地利用反转录PCR克隆出NS32基因,其片段大小为837 bp,序列同源性分析结果显示,该基因在不同牛冠状病毒分离株间高度保守.通过原核表达系统纯化蛋白并成功获得目的蛋白HiS-NS32,SDS-PAGE显示其大小约为32 ku.将纯化的蛋白免疫小鼠,免疫小鼠能够产生针对NS32蛋白的高水平特异性抗体,证明牛冠状病毒非结构蛋白NS32同样具有较高的免疫原性.本试验通过表达NS32蛋白证实了其免疫原性,为后期的NS32蛋白研究奠定了基础.
关键词:牛冠状病毒NS32基因原核表达免疫保护力
分类号:S858.23(动物医学(兽医学))
论文发表日期:2020-01-15
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1-5 )
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