猪流行性腹泻病毒S基因与SEA基因融合表达及免疫原性评价
唐奇
张溪研
费东亮
王书全
1.锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁 锦州 1210002.锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁 锦州 1210003.锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁 锦州 1210004.锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁 锦州 121000
摘要：试验旨在构建pET-28a-S-SEA融合表达质粒,并评价S-SEA蛋白的免疫原性.根据大肠杆菌密码子偏嗜性,对我国猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行毒株(GenBank:LT906620.1)的S基因与金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因(GenBank:MH053151.1)进行优化,通过柔性连接肽(GGGGS)连接后,克隆至表达载体pET-28a,得到pET-28a-S-SEA重组质粒,转化至宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测后,对最佳表达条件进行摸索.在此基础上,将亲和层析后的重组蛋白,免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,对免疫小鼠的血清特异性抗体水平和淋巴细胞增殖指数进行检测.结果成功构建pET-28a-S-SEA质粒,且在大肠杆菌中获得高效表达;小鼠试验结果表明,纯化的S-SEA蛋白能够诱导小鼠产生特异性免疫反应,促进淋巴细胞增殖,具有良好的免疫原性,为进一步研究猪流行性腹泻亚单位疫苗提供帮助.
关键词：猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白金黄色葡萄球菌肠毒素A密码子优化表达免疫原性
分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)
资助基金：辽宁省自然基金项目(201602320)
论文发表日期：2020-02-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 7-13 )
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