山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1的原核表达及生物信息分析
张成1
王玉婷2
杨勇飞2
柳璇2
吴锦艳3
尚佑军3
李有文2
1.塔里木大学动物科学学院 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技兵团重点实验室,新疆 阿拉尔843300;塔里木大学动物科学学院 新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室,新疆阿拉尔 843300;中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃 兰州 7300462.塔里木大学动物科学学院 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技兵团重点实验室,新疆 阿拉尔843300;塔里木大学动物科学学院 新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室,新疆阿拉尔 8433003.中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃 兰州 730046
摘要：试验旨在研究山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1的特性.研究以山羊痘病毒SS基因组株为模板,采用PCR方法扩增晚转录因子VLTF-1基因,采用基因克隆常规方法与pET-42b表达载体相连接构建原核表达载体,经菌液PCR、双酶切和测序鉴定,阳性克隆转化大肠杆菌BL21,以0.1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳和Western Blot检测表达情况;同时对VLTF-1基因及其蛋白特性进行生物信息学分析.结果显示,PCR扩增的目的基因全长783 bp,与参考株Pellor同源性为100％,推测其编码261个氨基酸.遗传进化树分析表明,羊痘病毒属的3个种各分成一个分支,目的基因与山羊痘毒株位于同一分支.测序结果显示,目的基因表达载体构建正确,SDS-PAGE检测表达了27 kDa的蛋白,Western Blot鉴定表明目的蛋白得到表达.生物信息学分析结果显示,SS株的VLTF-1基因与山羊痘病毒聚于一支,该蛋白是一个跨膜亲水蛋白,具有26个磷酸化位点,二级结构是其结构连接5个α-螺旋.研究表明,试验成功克隆晚转录因子VLTF-1基因,并诱导表达蛋白,预测该蛋白的生物学信息.
关键词：山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1基因原核表达生物信息学分析
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家重点研发计划(2018YFD0502006)国家自然科学基金(31360616)国家自然科学基金(31760741)
论文发表日期：2022-03-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 20-25 )
英文信息