鸡传染性支气管炎病毒一步法RT-qPCR检测方法的建立
王晓权1
马晓璐1
张东野2
曹祁峰3
李冰1
1.锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州1210002.锦州市农业农村综合服务中心,辽宁锦州1210003.辽宁益康生物股份有限公司,辽宁辽阳111000
摘要：研究旨在建立一种快速、高效、敏感、特异性强的方法以检测鸡传染性支气管炎病毒.通过比对鸡源传染性支气管炎病毒M基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条特异性TaqMan探针;通过优化反应条件,建立检测鸡传染性支气管炎病毒的一步法实时定量RT-qPCR方法.以重组质粒为模板制作标准曲线,并对方法各项指标进行评价.结果显示,该曲线标准曲线方程为:y=-3.442logx+37.614,相关系数R2=0.991;此方法灵敏度较高,最低可检测到1.0×102 copies/μL,比普通PCR灵敏100倍;特异性强,与4种常见鸡病毒病无交叉反应,重复性试验组间以及组内变异系数均小于2％.研究表明,此方法操作简便,可直接用作粗提RNA的模板检测,灵敏度高、特异性强、重复性好,可应用于鸡传染性支气管炎病毒早期检测.
关键词：鸡传染性支气管炎病毒一步法实时定量RT-qPCRM基因
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：辽宁省教育厅科学研究项目(LJKZ0800)
论文发表日期：2022-07-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1-6 )
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