鸡马立克氏病病毒和疫苗毒株PCR诊断方法的建立及其应用
周冬玉1
李国红2
靳泽华1
徐巧霞2
徐蓉2
张安定3
1.华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉430070;湖北省预防兽医学重点实验室生猪健康养殖协同创新中心,湖北武汉430070;农业农村部兽医诊断制剂创制重点实验室,湖北武汉4300702.武汉科前生物股份有限公司,湖北武汉4300703.华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉430070;湖北省预防兽医学重点实验室生猪健康养殖协同创新中心,湖北武汉430070;农业农村部兽医诊断制剂创制重点实验室,湖北武汉430070;科技部动物疫病联合研究中心,湖北武汉430070
摘要：研究旨在快速有效地诊断鸡马立克氏病(MD),区分MD血清Ⅰ型病毒(MDV-Ⅰ)与疫苗毒株.试验对Gen Bank发表的140余株MDV序列进行全基因组比对,选定MDV-Ⅰ型特有的meq基因设计1对引物,通过优化退火温度等条件建立了 MDV-Ⅰ的PCR诊断方法,评估该方法的特异性、灵敏度及重复性.结果显示,设定退火温度64℃、35个循环时,以MDV-Ⅰ型毒株为模板可扩增得到286 bp的片段;以CVI988或814疫苗毒株为模板时,可扩增得到463 bp的片段;该方法特异性强、灵敏度高,扩增结果稳定,可区分MDV-Ⅰ型毒株和疫苗毒株.应用该方法诊断1例免疫后仍有MD症状的鸡,可同时扩增约286和463 bp的片段;2个片段的测序结果显示,扩增出的片段分别与MDV-Ⅰ型毒株和疫苗毒株相匹配.研究表明,试验建立的PCR方法可快速有效地诊断MDV-Ⅰ型毒株感染鸡并筛选免疫失败的鸡群.
关键词：鸡马立克氏病马立克氏病病毒疫苗毒聚合酶链式反应
分类号：S858.31(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家重点研发计划(2016YFD0500801)
论文发表日期：2022-08-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 50-54 )
英文信息