不同形态卵母细胞和培养方式对牛体外胚胎生产的影响

李宁; 黄承俊

摘要：研究旨在优化牛体外胚胎生产体系,进一步提高囊胚的生产效率.试验随机选取假设受精的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)10枚及全部自然裸卵和透明状COCs,分别于平衡至少2h的100μLCR1aa培养微滴中进行体外培养,探索不同形态卵母细胞对牛体外胚胎生产的影响.另选择30枚具有3层以上正常形态的COCs进行体外受精,随机分为3组,各组分别用胚胎培养液CR1aa、CR1aa+10％FBS以及采用子宫角表皮细胞共培养方式进行孵化,探索不同培养方式对牛体外胚胎生产的影响.结果显示,CR1aa、CR1aa+10％FBS和CR1aa+子宫角表皮细胞单层共培养的胚胎卵裂率和囊胚率差异均不显著(P＞0.05),但在数值上子宫角表皮细胞单层培养在卵裂率方面具有一定优势.不同形态卵母细胞的体外受精效果差异较大,仅具有良好形态COCs的卵子受精后有可能发育到囊胚阶段;自然裸卵虽然可以体外受精,但卵裂率显著低于COCs(P＜0.05);透明状COCs无法受精,且体外受精48 h时观察基本均已退化完毕.研究表明,试验所用FBS和子宫角表皮细胞单层对体系的优化效果不明显.自然裸卵和透明状COCs难以有效产出可移植胚胎,在繁殖应用中可不做选择.