罗非鱼无乳链球菌gap基因的原核表达及免疫原性研究
杨洋1
农源1
陈林1
孙彤彤1
黄远城1
李恭贺2
郑喜邦2
吴文德2
1.广西大学动物科学技术学院,广西 南宁 5300042.广西大学动物科学技术学院,广西 南宁 530004;广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心,广西 南宁 530004;广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室,广西 南宁 530004;广西高校动物疫病预防与控制重点实验室,广西 南宁 530004
摘要：试验旨在探究罗非鱼无乳链球菌(GBS)膜蛋白gap的免疫原性.试验提取GBS的DNA,利用PCR扩增出gap基因,并与表达载体pET-28a-SUMO构建重组质粒,转化至大肠杆菌BL21;经IPTG诱导、SDS-PAGE分析和Western blot检测确定其表达效果.采用纯化的gap蛋白与弗氏佐剂乳化腹腔注射免疫罗非鱼,以间接ELISA法检测血清效价并使用GBS进行攻毒试验.结果显示,PCR扩增出1 011 bp大小的单条带gap基因,与预期一致;重组载体pET-28a-gap在23℃、0.4 mmol/L IPTG、12 h条件下成功表达49.8 ku的可溶性蛋白;ELISA检测显示,重组蛋白gap能够产生较高的血清抗体效价水平,对GBS攻毒后的罗非鱼相对保护率为64.1%.研究表明,重组蛋白gap具有较好的免疫原性,为鱼类的链球菌病的预防提供新的理论依据.
关键词：罗非鱼无乳链球菌gap基因原核表达重组蛋白疫苗主动免疫
分类号：S943(水产保护学)
资助基金：广西创新驱动发展专项(AA17204081-1)现代农业产业技术体系(2016LFY0301)
论文发表日期：2023-10-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1-5 )
英文信息