猪胆囊收缩素与生长抑素的融合表达与鉴定
赵婷芳1
赵铖1
黄嘉瑶2
刘婷1
曾沛暄1
黄晶1
唐青海1
唐斯萍2
1.衡阳师范学院生命科学学院 南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室,湖南 衡阳 4210082.衡阳师范学院化学与材料科学学院,湖南 衡阳 421008
摘要：研究旨在运用原核表达系统制备重组猪胆囊收缩素与生长抑素融合蛋白(rpCCK-SS).人工合成猪胆囊收缩素与生长抑素融合基因(pCCK-SS),分别克隆至pET28a和pCold GST载体中,转化BL21(DE3)或Transetta(DE3),构建重组表达菌株,采用双酶切和测序鉴定;并通过进行SDS-PAGE检测和Western blot鉴定优化诱导剂浓度和诱导时间.结果显示,pCCK-pSS基因全长693 bp,共编码231 aa;BL21(DE3)-pET28a-pCCK-SS表达目的蛋白分子量25 kDa,以包涵体形式存在;Transetta(DE3)-pCold-pCCK-SS表达目的蛋白分子量50 kDa,在上清与沉淀中均有表达,以沉淀中的包涵体形式为主,最优表达条件为15℃、0.25 mmol/L IPTG浓度诱导8 h.研究表明,试验成功运用两个表达载体表达了rpCCK-SS,且pCold GST的表达效果优于pET28a,为进一步开发新型促生长制剂奠定了基础.
关键词：猪胆囊收缩素猪生长抑素低温诱导融合表达
分类号：S828(家畜)
资助基金：大学创新创业训练项目(S202210546015)大学创新创业训练项目(cx-cy2022002)大学创新创业训练项目(S202310546001)湖南省教育厅科学研究项目(21A0442)衡阳市科技创新项目(202250045230)中央引导地方科技发展资金项目(2022ZYC091)湖南省普通高等学校教学改革研究项目(HNJG-20230871)
论文发表日期：2024-10-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1-6 )
英文信息