1种牛轮状病毒Taq-Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立
王秀明1
陈君彦2
础鲁3
刘艳霞1
1.辽宁益康生物股份有限公司,辽宁 辽阳 1110002.金宇保灵生物药品有限公司,内蒙古 呼和浩特 0101113.阿拉善左旗农牧业综合行政执法大队,内蒙古 巴彦浩特 750300
摘要：试验旨在建立一种可简便、快速地检测牛轮状病毒(BRV)的Taq-Man荧光定量RT-PCR方法,试验通过分析比对NCBI下载的BRV VP7基因序列,在VP7基因的保守区设计两对特异性引物及Taq-Man探针,经反应条件优化,建立BRV的Taq-Man荧光定量RT-PCR方法.利用建立的检测方法检测标准品,绘制标准曲线,检测方法的特异性、灵敏性和稳定性,并对临床样品及疫苗半成品进行检验.结果显示,建立的Taq-Man荧光定量RT-PCR方法的最低检测限为10 copies/μL,组内和组间重复变异系数(CV)均小于3.50%.检测临床样品和疫苗半成品,疫苗半成品均检测阳性,临床样品检测阳性率69%.研究表明,BRV Taq-Man荧光定量RT-PCR检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高,对BRV的诊断检测及疫苗生产具有重要的参考价值.
关键词：牛轮状病毒(BRV)Taq-Man探针荧光定量RT-PCRVP7基因
分类号：S852.65+3(动物医学（兽医学）)
论文发表日期：2025-03-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 11-15 )
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