下调circKIF4A对甲状腺癌细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响及其机制探讨
黄栋烨
吴松
唐海林
陈文宽
中山大学肿瘤防治中心,广东广州 510060
摘要：目的 探讨下调circKIF4A对甲状腺癌细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响及潜在的调节机制.方法 通过对甲状腺癌细胞系、干细胞系以及30例甲状腺癌肿瘤组织与癌旁组织标本进行qRT-PCR实验来检测甲状腺癌组织与细胞系以及干细胞系中circKIF4A的表达水平.转染siRNA靶向下调甲状腺癌细胞中的circKIF4A表达,转染siRNA作为对照,并通过CCK8实验、Transwell实验以及细胞球囊形成实验来评估si-circKIF4A对甲状腺癌细胞的增殖、侵袭能力及干细胞特性的影响.利用CircInteractome和TargetScan生信工具预测circKIF4A可能结合的miR-NA及其下游靶基因.此外,通过荧光素酶报告基因实验以及qRT-PCR和Western blotting法来验证这些分子间的互作关系.结果 与正常甲状腺上皮细胞相比,甲状腺癌的组织及细胞系中circKIF4A表达显著增高.敲低circKIF4A表达显著降低了甲状腺癌TPC-1和KAT-5细胞系的增殖、侵袭能力和细胞干性成球能力(P均＜0.05).核质分离实验发现,circKIF4A主要存在于细胞质中.miR-335-5p在敲低circKIF4A的TPC-1和KAT-5细胞系中的表达均上调(P均＜0.05);在野生型circKIF4A细胞中,共转染miR-335-5p相对于野生型circKIF4A+miR-NC共转染者,荧光酶活性显著降低(P＜0.05).与野生型KIF4A+miR-NC相比,野生型KIF4A+miR-335-5p处理细胞中的荧光酶活性下降(P＜0.05).在转染miR-335-5p的细胞中,与转染miR-NC相比,KIF4A的表达减少(P＜0.05).相比转染si-NC,转染si-circKIF4A的细胞中KIF4A mRNA、蛋白表达降低;而与转染si-circKIF4A比较,添加miR-335-5p抑制剂的细胞中KIF4A mRNA、蛋白表达上调(P均＜0.05).结论 circKIF4A可通过调控miR-335-5p,间接上调KIF4A蛋白的表达,从而增强甲状腺癌细胞的增殖、侵袭与细胞干性成球能力.
关键词：circKIF4A甲状腺癌干细胞miR-335-5pKIF4A
分类号：R736.1(内分泌腺肿瘤)
资助基金：广东省基础与应用基础研究基金项目(2022A1515012261,circKIF4A;KIF4A)广州市科技计划项目(202201010780,circKIF4A)
论文发表日期：2024-06-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 26-32 )
英文信息