共表达鸡IBDV VP2和IL-2基因的重组毕赤酵母的构建及免疫原性
丁轲
余祖华
张春杰
程相朝
刘一尘
王臣
1.河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳,4710032.河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳,4710033.河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳,4710034.河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳,4710035.河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳,4710036.河南科技大学,动物科技学院,河南,洛阳,471003
摘要：通过重叠延伸PCR扩增IL2-VP2串联基因,克隆到pMD18-T载体上,亚克隆正向插入到毕赤酵母表达质粒pPICZαA中,经PCR和双酶切鉴定表明成功构建了酵母重组表达载体 pPICZαA-IL2-VP2.将该重组质粒线性化后电击转化入感受态毕赤酵母X-33菌株,构建成分泌型表达IL2-VP2的酵母工程菌株.经甲醇诱导后,通过SDS-PAGE、Western-blot活性检测分析表明IL2-VP2基因长度为1.85 kb,包含缺失了TAA终止密码子的IL-2基因和缺失了ATG起始密码子的VP2基因,两个基因之间以高度柔韧性的(Gly-Gly-Gly-Ser)编码核苷酸相连接,并在该体系中得到分泌表达,分子量约为50 kD,且表达产物对传染性法囊病毒具有较好的反应原性.
关键词：重叠延伸PCR鸡IL-2IBDV VP2融合表达毕赤酵母
分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家"十一五"科技支撑计划项目(2007Z06-017)河南省自然科学基金项目(04240500101)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 74-78 )
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