不同载体-宿主菌组合对重组蛋白表达量的影响
杨刚刚1
王泽2
白海静1
杨亚娟1
徐存拴1
1.河南师范大学 生命科学学院,河南 新乡 453007; 河南省-科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地和河南省生物工程重点实验室,河南 新乡 4530072.河南新乡华星药厂,河南 新乡,453007
摘要:研究了不同载体-宿主菌组合对毕赤酵母重组蛋白表达量的影响。以豹蛙抗瘤酶(onconase,ONC)、IL-1α、IL-1β、IL-1 Ra、人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)与 ONC 的融合蛋白即 HSA-(Gly4 Ser1)3-ONC(简称 HSA-ONC)等5种重组蛋白为报告蛋白,设计并合成了5种基因。分别插入3种酵母表达载体 pPIC9、pPIC9K 和 pPICZα-A 中,转化3种毕赤酵母受体菌 X-33、GS115和 SMD1168。筛选得到7种载体-宿主菌组合,在摇瓶规模进行诱导并定量。研究结果表明:5种外源蛋白在 pPICZα-A /X-33组合中表达量最高,在pPIC9/SMD1168组合中最低。从重组蛋白表达量来说,pPICZα-A /X-33组合优于其他6种载体-宿主菌组合。
关键词:载体宿主菌载体-宿主菌组合重组蛋白表达量
分类号:Q815(生物工程学(生物技术))
资助基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2012CB722304)河南省自然科学基金(142300413212)河南省自然科学基金(132300413208)河南省科技攻关计划重大项目(111100910600)
论文发表日期:2016-03-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 78-81,87 )
