副猪嗜血杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立
侯魁1
丁轲2
刘守业3
余祖华1
赵战勤1
1.河南科技大学 河南省动物疫病与公共卫生重点实验室,河南 洛阳,4710232.河南科技大学 河南省动物疫病与公共卫生重点实验室,河南 洛阳 471023;河南科技大学 宏翔生物饲料实验室,河南 洛阳 4710233.大石桥市高坎动物卫生监督所,辽宁 营口,115112
摘要：为了建立一种简便、快速、灵敏、特异的副猪嗜血杆菌(Hps)检测方法,以Hps的16S rRNA保守区域片段为靶序列,选择6个特异性区域,设计4条特异性引物F3、B3、FIP和BIP.经优化反应体系、检测灵敏性和特异性,建立Hps的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.研究结果表明:该方法的最优反应体系是引物c(F3):c(FIP)或c(B3):c(BIP)为1:4、Mg2+浓度为2 mmol/L、dNTPs浓度为6 mmol/L,最低检出量为0.241 pg/μL DNA.该方法灵敏度是PCR法的100倍,且能够特异性检测出Hps,不能检测出猪链球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和金黄色葡萄球菌.
关键词：副猪嗜血杆菌16SrRNA环介导等温扩增灵敏性特异性
分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家重点研发计划(2016YFD0500700)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 59-62,69 )