跨膜型CD59分子的构建及其在小鼠NIH3T3和EL-4细胞表达的研究
白云1
姜曼1
韩根成1
王更银2
朱锡华1
1.第三军医大学基础部免疫学教研室,重庆,4000382.白求恩国际和平医院检验科,石家庄,050026
摘要:应用RT-PCR方法,从U937细胞总RNA中扩增得到编码人CD46分子跨膜区和膜内区cDNA片段,用PCR方法扩增得到编码成熟的CD59胞外区蛋白的cDNA片段,连接并构建了跨膜型的CD59分子cDNA.快速克隆于pGEM-T Easy载体进行序列测定,证实了其阅读框的完整和序列的正确性.进一步将cDNA重组于逆转录病毒pLXSN载体,电穿孔转染PA317细胞,用病毒上清感染小鼠NIH3T3、EL-4细胞,经FACS检测筛选获得表达重组CD59TM分子的阳性细胞克隆.本研究为更深入地研究GPI锚固的CD59分子与细胞活化信号转导的关系建立了可靠的细胞模型;同时也为探讨应用跨膜型的CD59分子对PNH进行基因治疗奠定了良好的基础.
关键词:CD59跨膜型补体基因表达
分类号:R392.12(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(39630296)
论文发表日期:1999-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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