小鼠白细胞介素-12融合蛋白编码基因的构建与表达研究
成军1
赵鸿2
钟彦伟1
刘妍1
杨继珍1
董菁1
斯崇文2
王勤环2
1.解放军302医院传染病研究所基因治疗研究中心,北京,1000392.北京医科大学第一医院传染病科,北京,100034
摘要:目的构建小鼠白细胞介素-12的融合基因,并进行初号表达.方法通过重叠序列引物的设计与多聚酶链反应(PCR)技术,将小鼠IL-12的40kDa多肽链基因与35kDa多肽链基因,以甘氨酸接头(Gly4Ser)3序列连接成为融合蛋白编码基因,构建融合蛋白表达载体,转染小鼠成纤维细胞SVT2,表达具有生物学活性的融合蛋白型IL-12.结果构建的小鼠IL-12表达载体经测序无突变发生.以G418筛选转染的SVT2细胞,获得数十个抗性细胞克隆,测定其IL-12生物学活性,分泌量达52.1~112.6pg/ml.表达的融合型小鼠IL-12具有生物学活性.结论构建并表达了单链型小鼠白细胞介素-12.
关键词:白细胞介素-12融合蛋白转染多聚酶链反应甘氨酸接头
分类号:R392.11(医学免疫学)
论文发表日期:2000-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 33-36 )
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