结合酪氨酸蛋白激酶受体EphB2的功能短肽的筛选
张晓光1
韩炯1
韩景田2
刘新平1
药立波1
聂晓燕1
苏成芝1
1.第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,7100322.武譬医学院微生物学教研室,天津,300162
摘要：目的筛选能结合酪氨酸蛋白激酶受体EphB2的功能短肽.方法PCR扩增EphB2的配体结合区,定向克隆到融合表达质粒载体pRSET A中,阳性克隆经IPTG诱导表达融合蛋白,并利用Ni-NTA金属螯合亲和层析在变性条件下对表达的蛋白进行纯化,以此纯化蛋白为靶,将其包被于ELISA板上,进行3轮亲和筛选.结果电泳分析表明:表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,纯化蛋白质的纯度大于95%.从噬菌体随机12肽库中筛选到1 3个噬菌体阳性克隆.结论获得了具有结合EphB2活性的阳性噬菌体克隆且有共同的基序.
关键词：EphB2表达金属螯合层析噬菌体表面呈现随机短肽库
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(39800027)
论文发表日期：2000-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 342-345 )
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