抗HIV-1 gp120单链抗体基因的克隆及序列测定
王宏伟
金宁一
许崇波
赵宝华
殷震
1.解放军军需大学研究所病毒室，解放军基因工程实验室，吉林 长春 1300622.解放军军需大学研究所病毒室，解放军基因工程实验室，吉林 长春 1300623.解放军军需大学研究所病毒室，解放军基因工程实验室，吉林 长春 1300624.解放军军需大学研究所病毒室，解放军基因工程实验室，吉林 长春 1300625.解放军军需大学研究所病毒室，解放军基因工程实验室，吉林 长春 130062
摘要：人Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)的外膜蛋白gp120在病毒
的感染侵入过程中发挥重要的功能[1]。gp120的单克隆抗体
在HIV-1感染的诊断和治疗中起着十分重要的作用[2],但鼠
源性抗体因在人体内可产生较强的免疫原性，因此限制了它
的应用。利用基因工程手段制备单链抗体ScFv可以克服鼠
源单抗的这一缺点，又可进行大规模表达，因此具有重要的
临床意义。本实验分离制备抗HIV-1 gp120的单链抗体基因，
为今后的进一步应用打下了基础。
1 材料与方法[3]
1.1 材料 杂交瘤细胞株102,分泌抗HIV-1外膜蛋白
gp120的单克隆抗体，由本室制备保存；各种内切酶及修饰酶
均购自大连宝生物公司；RNA regents total RNA isolation
system,polyA tract mRNA isolation system IV wizard PCR
preps DNA purification system,mouse ScFv module recom-
binant phage antibody system分别购自Promage公司和
pharmacia公司。
1.2 方法
1.2.1 杂交瘤细胞总RNA的提取：培养单克隆抗体杂交瘤
细胞株102至最佳生长状态，计算细胞总量大约为2×107～
3×107。收集细胞，在无RNA酶环境下分别按RNA gents
total RNA isolation system和polyA tract mRNA isolation
systemⅣ提供的方法提取细胞总RNA和分离纯化mRNA。
1.2.2 cDNA第一条链的合成：将提取到的mRNA按
mouse ScFv module recombinant phage antibody system提
供的方法，在反转录酶的作用下合成cDNA。
关键词：人免疫缺陷病毒外膜蛋白单链抗体
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(39825119)
论文发表日期：2000-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 468,470 )
英文信息