应用重组PCR技术构建人单链白细胞介素12融合基因
张梅1
司履生2
王一理2
1.西安交通大学第一医院血液病研究室,2.西安交通大学基础医学院免疫病理学研究室,
摘要：目的 构建人单链白细胞介素12（hscIL-12）融合基因并在真核细胞中进行表达，为进一步研究hscIL-12融合蛋白的生物学活性奠定基础。方法 应用重组PCR技术将hIL-12p40和p35亚单位两段编码序列的cDNA通过一疏水性多肽接头（Gly4Ser）3碱基序列进行前后拼接（IL-12 p40-多肽接头-p35），构建hscIL-12融合基因，并进行核苷酸序列测定，进一步将hscIL-12融合基因插入pcDNA3．1真核表达载体中，转染COS-7细胞表达hscIL-12融合蛋白，并行Western blot分析。结果 该融合基因经DNA序列分析表明：p40、p35、linker的连接顺序、方向及序列完全正确，融合基因可在COS-7细胞中表达hscIL-12融合蛋白。Western blot显示该融合蛋白分子量为70000u，可与鼠抗人IL-12 p40／p70单克隆抗体特异性结合。结论 重组PCR技术是十分有效、可靠的体外基因重组方法。
关键词：重组PCR人白细胞介素12(hIL-12)人单链白细胞介素12(hscIL-12)融合基因
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：陕西省自然科学基金(99SM49)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 22-26 )
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