胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型ScFv的制备
何凤田
聂勇战
陈宝军
徐立
韩者艺
乔太东
安华章
樊代明
1.第四军医大学西京医院消化病研究所,2.第四军医大学西京医院消化病研究所,3.第四军医大学西京医院消化病研究所,4.第四军医大学西京医院消化病研究所,5.第四军医大学西京医院消化病研究所,6.第四军医大学西京医院消化病研究所,7.第四军医大学西京医院消化病研究所,8.第四军医大学西京医院消化病研究所,
摘要：目的 制备胃癌单抗MGd1的单链可变区片段（singlechainvariablefragment，ScFv），为胃癌体内诊疗研究提供候选靶向载体分子。方法 从MGd1杂交瘤分离mRNA，RT-PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因（VH和VLDNA），二者经linkerDNA连接形成ScFv DNA。将ScFvDNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1，经M13KO7感染后，获得重组噬菌体抗体ScFv。以高表达MGd1结合抗原的细胞株KATOⅢ对重组噬菌体抗体ScFv进行两轮筛选后，随机挑取克隆经ELISA筛选MGd1ScFv单克隆，并对其结合抗原的能力进行鉴定。结果 VH、VL和ScFvDNA分别约为340、320和750bp。经两轮亲和筛选后，在随机筛检的30个克隆中得到12个噬菌体呈现型MGd1ScFv单克隆，其中结合抗原能力强的克隆有5个。结论 用噬菌体呈现技术成功地获得了单抗MGd1的ScFv，为拓展该抗体的应用范围奠定了基础。
关键词：胃癌单克隆抗体单链可变区片段噬菌体呈现
分类号：R735.203(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(39525020)国家高技术研究发展计划（863计划）(102-10-01-06;39900068)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 165-168 )
英文信息