抗CEA嵌合小分子抗体的构建与表达
赵泽国1
冉宇靓1
孔健2
孙立新1
遇垅1
刘军1
杨治华1
1.中国医学科学院,中国协和医科大学肿瘤研究所细胞生物及分子生物学室,2.卫生部北京生物制品研究所,
摘要:目的 构建表达抗CEA小分子抗体,以利于放射免疫诊断及导向治疗。方法 构建CEA单链抗体基因,克隆入载体pKpL-3a,在大肠杆菌中包涵体表达,ELISA检测活性。将轻重链基因克隆入分泌型表达载体pSCMH,在大肠杆菌中表达,ELISA检测活性。将CEA嵌合抗体的轻链和Fd基因克隆入杆状病毒表达载体pAcUW51中,在sf9细胞中分泌表达,ELISA检测活性及测定产量,竞争抑制ELISA测定其识别的抗原表位。结果 多种方法复性的包涵体及原核分泌表达的单链抗体未测到活性。昆虫细胞中表达的小分子抗体具抗体活性,产量为1.7 μg/mL,竞争抑制实验显示其与亲本鼠单抗C50识别相同的表位。结论 该CEA抗体基因在大肠杆菌中不能表达出有功能的分子,而在昆虫细胞中表达了具活性抗体分子;某些抗体基因只有在真核细胞中才能表达出有功能的抗体分子。
关键词:癌胚抗原小分子抗体抗体工程
分类号:R392.11(医学免疫学)
资助基金:国家科技攻关计划(96-906-01-23)
论文发表日期:2001-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 169-172 )
英文信息展开
免疫学杂志

免疫学杂志

北大核心CSTPCD
ISSN:1000-8861
年,卷(期):2001,17(3)