抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21基因克隆 及单链抗体的构建和表达
安广宇
董宁征
阮长耿
1.苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,2.苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,3.苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,
摘要：目的 将能与血小板膜糖蛋白Ⅲa特异结合的单克隆抗体SZ-21构建成单链抗体，为其临床应用奠定基础。方法 通过逆转录及多聚酶链反应，扩增并克隆SZ-21的可变区基因VH、VL，经测序后构建SZ-21单链抗体（SZ-21ScFv），在大肠杆菌中进行表达。ELISA和Western印迹检测其与血小板的结合特性。结果 VH、VL可变区基因符合小鼠抗体可变区特征，SZ-21ScFv基因拼接正确。表达产物除少量为分泌型外，主要以包涵体形式存在，表达量占菌体蛋白的21％。经过变性和复性后，该单链抗体保留了与血小板特异结合的能力。结论 成功表达了SZ-21单链抗体，该小分子抗体具有特异结合血小板的能力，有望用于抗血栓治疗。
关键词：血小板膜糖蛋白单链抗体(ScFv)原核表达
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：江苏省科技发展计划(BS2000039)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 200-203 )
英文信息