RARE介导的视黄酸可调控的IFN-α表达载体的构建与鉴定
张乾勇1
糜漫天1
程天民2
韦娜1
朱晓霞1
1.第三军医大学预防医学系营养卫生学教研室2.第三军医大学防原医学教研室全军复合伤研究所
摘要：目的构建一个含视黄酸反应元件(RARE)的IFN-α表达载体,使其在真核细胞内的表达受视黄酸(RA)的诱导.方法运用DNA重组技术构建含有4个RARE重复序列的IFN-α真核表达载体(pRARE4-IFN-α),经酶切、PCR鉴定和测序确认后,用脂质体转染法使其转染HL-60细胞(人早幼粒白血病细胞系)、Bcap-37和MCF-7细胞(人乳腺癌细胞系),RA处理后,RT-PCR分析IFN-α mRNA水平,ELISA检测培养细胞上清中IFN-α含量.结果 pRARE4-IFN-α转染的HL-60、Bcap-37和MCF-7细胞,IFN-α分泌量为1 6～24 ng/(mL@106)细胞,而经RA处理24 h,IFN-α表达水平可增加8～13倍,但经RA处理24 h的细胞,换无RA的新鲜培养基继续培养24 h后,IFN-α表达水平又下降到25～34 ng/(mL@106)细胞.结论带有RARE的IFN-α表达载体转染细胞后,外源性IFN-α基因的表达受RA的诱导.
关键词：视黄酸干扰素视黄酸反应元件表达载体
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)R730.5(一般性问题)
资助基金：国家自然科学基金(39770303)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 277-280 )
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