人白细胞介素10重组腺病毒载体的构建
黄宗文1
修清玉1
韩焕兴2
石昭泉1
1.第二军医大学长征医院呼吸内科2.第二军医大学长征医院实验科
摘要：目的构建人白细胞介素10重组腺病毒载体,为真核表达及其临床研究提供实验基础.方法自行设计一对引物,应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,从活化的正常人外周血单个核细胞中扩增出hIL-10cDNA,并将hIL-10cDNA克隆到腺病毒载体pAdCMV-Link1中,构建pAdCMV/hIL-10表达质粒.将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共转染293细胞,通过同源重组产生hIL-10重组腺病毒.结果扩增到的cDNA片段经酶切鉴定、PCR扩增、DNA测序最终确定为hIL-10cDNA;所得人白细胞介素10重组腺病毒滴度为1.9×109 pfu/mL.结论本实验为今后研究hIL-10的生物学活性及炎症性疾病的基因治疗提供了基础.
关键词：白细胞介素10腺病毒cDNA序列测定
分类号：R392.1(医学免疫学)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 338-341,348 )
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