促肾上腺皮质激素单克隆抗体的筛选和鉴定
汪保安
汪寅章
夏风城
陆思珍
黄兆坚
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马芳玲
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摘要：目的制备促肾上腺皮质激素(ACTH)单克隆抗体,拟建立高灵敏度ACTH-IRMA或ELISA.方法 ACTH1-13、ACTH1-28、ACTH1-39和ACTH18-39分别与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,在背部皮下和腹腔注射免疫BALB/c鼠.按常规方法进行细胞融合,以RIA法检测培养上清液,阳性孔经亚克隆,获得2株分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株;瘤细胞种于预致敏的BALB/c鼠腹腔,批量生产单抗性腹水;琼脂扩散法鉴定抗体类型;利用标准曲线的参数计算单抗的亲合常数;亲合纯化单抗并进行抗体固化试验.结果从ACTH1-28免疫鼠获得单抗株为5G2,从ACTH1-13免疫鼠获得单抗株为D3;单抗腹水50%结合率时腹水最终稀释度分别为5×103和2×103;抗体类型均为IgG1/λ;5G2和D3亲合常数分别为5.1×109 LM-1和4.9×107 LM-1;抗体包被实验显示5G2和D3的固化抗体量分别为1.4 μg和8.8 μg时结合率达到饱和.结论 5G2和D3可以用于构建灵敏的ACTH-IRMA或ELISA.
关键词：促肾上腺皮质激素单克隆抗体
分类号：Q813.2(细胞工程)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 388-390 )
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