MG7胞内抗体的表达及活性鉴定
喻召才
丁杰
樊代明
张学庸
1.第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所,2.第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所,3.第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所,4.第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所,
摘要：目的制备MG7胞内抗体并鉴定其分子量和抗原结合活性.方法以含MG7 scFv基因的质粒pCANTAB5E为模板,PCR扩增MG7 scFv基因,并在其3'端引入一段内质网滞留序列(SEKDEL),即形成MG7胞内抗体基因.DNA测序后,将MG7胞内抗体基因克隆到表达载体pGEX-3X中,转化宿主菌HB2151,IPTG诱导,SDS-PAGE分析产物分子量,ELISA检测产物的MG7抗原结合活性.结果电泳分析发现融合基因片段长约780 bp.DNA序列分析显示,SEKDEL与MG7 scFv基因正确融合;SDS-PAGE分析发现MG7胞内抗体的分子量为32 000 u;ELISA检测发现MG7胞内抗体具有明显的抗原结合活性.结论我们成功地制备并表达了MG7胞内抗体,为利用其探讨MG7抗原的功能及胃癌的基因治疗奠定了基础.
关键词：胞内抗体MG7基因治疗胃癌
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：军队医药项目(962047)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 410-412 )
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