超抗原SED在大肠杆菌中的表达
李亚斐
朱锡华
黄云辉
杨劲
1.第三军医大学免疫学研究所,重庆,4000382.第三军医大学免疫学研究所,重庆,4000383.第三军医大学免疫学研究所,重庆,4000384.第三军医大学免疫学研究所,重庆,400038
摘要：目的构建稳定的SED原核表达系统.方法采用PC R技术扩增葡萄球菌D型肠毒素(SED)超抗原的成熟蛋白编码区DNA序列,构建SED DNA与6个组氨酸基因融合的表达载体pTrcHis-SED,转入E.coli DH5α,IPTG诱导后,用SDS-PAGE和免疫印迹检测融合蛋白的表达情况.目的蛋白用Ni-NTA金属亲和层析法进行纯化,SDS-PAGE和毛细管电泳检测蛋白纯度.结果成功构建了原核表达载体pTrcHis-SED.分子量约为28 000 u的6His-SED融合蛋白可在E.coli DH5α中稳定表达.Ni-NTA金属亲和层析后得到纯度较高(>95%)的SED融合蛋白,且具有免疫学活性.结论本研究为SE D免疫识别研究奠定了实验基础.
关键词：超抗原葡萄球菌D型肠毒素原核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 92-94 )
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