抗P选择素免疫小鼠单链抗体噬菌体展示文库的构建和筛选
董宁征
安广宇
江淼
阮长耿
1.苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,2150062.苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,2150063.苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,2150064.苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,215006
摘要：目的构建抗P-选择素的全套单链抗体噬菌体表面展示文库,从中筛选与P-选择素高亲合力的单链抗体,为其临床应用奠定基础.方法从P-选择素免疫的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,用抗体可变区混合引物扩增全套轻、重链可变区基因,经重叠延伸反应,装配成单链抗体(ScFv) 基因,将其克隆到噬菌体载体pHEN1中,构建单链抗体噬菌体抗体库.对抗体库进行亲合筛选后, ELISA法鉴定抗活化血小板单链抗体.结果经过5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集过程,phage-ELISA得到一个ELISA活性较高的与P-选择素结合的克隆.序列测定符合抗体可变区结构特点. 结论成功构建了全套抗P-选择素单链抗体噬菌体展示文库,并筛选得到具有P-选择素结合能力的单链抗体基因 .
关键词：活化血小板单链抗体(ScFv)噬菌体抗体库
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 119-122 )
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