抗甲型肝炎病毒抗体Fab在大肠杆菌中的表达
于长明1
宋宏彬1
杜桂鑫1
徐静1
徐志凯2
王海涛1
1.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000712.第四军医大学微生物学教研室,陕西,西安,710032
摘要:目的在大肠杆菌中高效表达人源抗HAV抗体Fab,为进一步研究该抗体的功能奠定基础.方法依次将抗HAV抗体的Fd及轻链基因克隆到表达载体pASK84的不同信号序列下,构建成Fab表达质粒,在大肠杆菌JM83中进行表达,并对表达产物进行复性.用SDS-PAGE、western blot和ELISA法检测Fab的表达及其与甲肝病毒抗原的结合活性.结果构建了抗HAV Fab的重组表达质粒p84Fab,在大肠杆菌JM83中获得表达,表达的Fab占全菌的25%,主要以包涵体形式存在,复性后具有抗原结合活性;培养基、菌体可溶性蛋白部分也能检测到有抗原结合活性的Fab. 结论抗HAV抗体Fab在大肠杆菌中得到了表达,并具有良好的抗原结合活性.
关键词:甲型肝炎病毒Fab基因表达
分类号:Q78(基因工程(遗传工程))
论文发表日期:2002-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 149-152 )
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