影响人干细胞因子基因高效表达的因素探讨
洪海燕1
赖春宁2
冯健男2
王建安2
刘涛2
戚中田1
沈倍奋2
1.第二军医大学微生物学教研室,上海,2004332.军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室,北京,100850
摘要：目的分析SD序列长度、基因起始码ATG和终止码TAA上下游处RNA的二级结构及密码子偏性等影响表达效率的主要因素,以期实现重组人干细胞因子在原核细菌中高效表达.方法分析并修改编码人SCF氨基酸的密码子,分段合成改造后的基因,PCR一次性完成拼接,将基因克隆到pBV-220载体上,诱导表达.结果天然人SCF基因在pBV-220载体的表达占菌体总蛋白的9.5%,基因改造后SCF占菌体总蛋白的27%,表达的蛋白能够为SCF的单克隆抗体所识别,初步纯化的sCF蛋白纯度大于80%,能够促进Mo7e细胞的增殖活性.结论密码子偏性是影响SCF在原核细菌中高效表达的主要因素,通过改变密码子偏性能过实现高效表达.
关键词：pBV-220RNA二级结构蛋白表达全基因合成
分类号：Q75(分子遗传学)Q812(生物工程学(生物技术))
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 225-228 )
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