趋化因子新变异体MPIF-1β重组蛋白的纯化和活性分析
范慧1
莫晓宁1
曹丽2
宋泉声2
黄大无2
马大龙2
1.北京医科大学联合生物工程公司,北京,1000832.北京大学人类疾病基因研究中心,北京,100083
摘要：目的为深入研究趋化因子新变异体MPIF-1β的结构与功能,利用pKPL3a-MPIF-1β 表达质粒进行原核表达、纯化工艺研究及活性检测.方法 MPIF-1β重组蛋白以包涵体形式存在,占总菌体蛋白的 15%,工程菌经超声破碎,包涵体洗涤,变性、复性、肝素Sepharose CL-6B 亲和层析,CM Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200层析分离获得目的蛋白.结果还原SDS-PAGE分析相对分子质量15 000 u,纯度99.0%,纯化倍数6.6倍,总回收率9.07%.体外生物学活性检测证明MPIF-1β 重组蛋白对小鼠骨髓集落形成具有抑制作用,对U937细胞具有趋化活性,且呈一定的剂量依赖关系.结论建立了简便可行的MPIF-1β重组蛋白纯化路线,初步证明了MPIF-1β的生物学活性.
关键词：趋化因子MPIF-1βMPIF-1重组蛋白
分类号：R392(医学免疫学)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 311-314 )
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