人类白细胞抗原-G突变体cDNA克隆及在K562细胞上的表达
颜卫华
范丽安
1.上海第二医科大学上海市免疫学研究所,上海,2000252.上海第二医科大学上海市免疫学研究所,上海,200025
摘要：目的克隆人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antligen-G,HLA-G)突变体cDNA,并使其在HLA-Ⅰ类阴性的K562细胞上获得稳定表达,为研究配-受体之间的识别机制奠定基础.方法用RT-PCR方法从人子宫蜕膜组织扩增出HLA-G cDNA,得到全长HLA-G PCR产物后,用桥式PCR方法进行定点点突变,将突变的目的基因亚克隆于逆转录,将突变的目的基因亚克隆于逆转录mG-pLNCX表达载体,采用感染的方法将重组质粒转入K562细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用单克隆抗体W6/32进行FACS及mRNA检测,观察HLA-G突变体在靶细胞表面的表达.结果 HLA-G突变体分子在经mG-pLNCX转染的靶细胞表面获得稳定高表达.结论成功构建了mG-pLNCX表达载体,并使HLA-G突变体分子在HLA-Ⅰ类阴性的靶细胞K562细胞上获得稳定表达.
关键词：HLA-G克隆点突变K562
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30070784)上海市科委项目(02DJ14054)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 7-10 )
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