幽门螺杆菌Mr 26 000外膜蛋白编码基因在DH5α中的表达
姜政1
黄爱龙2
陶小红1
王丕龙1
蒲丹1
1.重庆医科大学第一附属医院消化科,重庆,4000162.重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010
摘要：目的构建含幽门螺杆菌(H.pylori)Mr 26 000外膜蛋白编码基因的重组载体并在E. coli DH5α(PREP4)中表达.方法用PCR从H.pylori染色体中,扩增Mr 26 000外膜蛋白编码基因片段.将目的基因与pQE30同时经BamH Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切、纯化、连接后,转化含有目的基因的重组载体.以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌DH5α并表达.表达产物经纯化后,用ELISA法检测其抗原性.结果插入的基因片段为H.pylori Mr 26 000的外膜蛋白编码基因与Tomb等报道相比较,有1.1%的碱基发生变异, 1.5 1%的氨基酸残基改变;目的基因经表达其蛋白Mr为26×103 ,可溶性表达产物占全菌总蛋白的20%以上;目的蛋白经Ni2+-NTA琼脂糖树脂纯化后,其纯度达95%以上,且该目的蛋白可被H.pylori阳性患者的血清所识别,具有良好的抗原性.结论成功地克隆并表达了H.pylo ri Mr 26 000的外膜蛋白编码基因,为H.pylori蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的研究打下了基础.
关键词：幽门螺杆菌外膜蛋白基因原核表达
分类号：R377(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)Q81(生物工程学(生物技术))
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 117-120,126 )
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