结核杆菌Ag85A/GM-CSF嵌合表达质粒的构建及表达
谢勇恩1
鲍朗2
张会东2
陈玮2
1.川北医学院病理生理学教研室,四川,南充,6370072.四川大学华西基础医学院感染,免疫研究室,四川,成都,610041
摘要：目的探索对结核病DNA疫苗进行基因修饰的新方法.方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得结核杆菌Ag85A抗原蛋白基因的成熟肽编码区,以经PHA诱导后的小鼠脾组织总RNA为模板,通过RT-PCR获得小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的cDNA,将二者定向克隆入质粒pBK-CMV中构建含嵌合目的基因的重组质粒,转染培养的COS7细胞后检测嵌合目的基因的表达.结果成功构建了小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子cDNA与结核杆菌Ag85A抗原基因的真核嵌合表达质粒, 重组质粒能在COS7细胞中进行稳定表达.结论本研究首次将细胞因子基因与结核杆菌免疫保护性抗原基因嵌合构建嵌合DNA疫苗,为进一步研究其在动物体内的免疫原性和免疫保护性奠定了基础.
关键词：结核杆菌Ag85AGM-CSF嵌合表达
分类号：R52(结核病)
资助基金：四川省应用基础研究计划(G01020)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 146-149 )
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