人源抗-HBs Fab优化表达条件的初步探讨
安峰1
陈玉川1
姜小华2
韩焕兴2
1.中山大学中山医学院法医病理学教研室,广东,广州,5100802.第二军医大学长征医,院临床免疫中心,上海,200003
摘要：目的利用含重组质粒pBAD/HBs Fab的Top10大肠杆菌 ,优化表达人源抗-HBs Fab.方法选取含pBAD/HBs Fab载体的Top10大肠杆菌单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于摇瓶和 KLF2000发酵罐中,摇瓶培养表达采用不同的菌体诱导起始密度、诱导剂浓度、诱导表达温度和诱导表达时间.发酵罐培养表达采用不同的培养基和菌体诱导起始密度.诱导表达完毕后,纯化蛋白,比较表达量,并鉴定所获蛋白的抗原性和生物学活性.结果用摇瓶优化表达后,Fab蛋白占菌体总蛋白的6%,为0.8 mg/g菌体,利用发酵培养可进一步增加菌量,使蛋白表达量达80 mg/ L.所获蛋白经鉴定显示有较好的生物学活性.结论用重组质粒pBAD/HBs Fab,Top10表达系统,可得到80 mg/L的具有较好生物学活性的人源抗-HBs Fab蛋白,为批量生产作了准备.
关键词：人源抗乙肝表面抗原Fab片段优化表达发酵
分类号：R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 150-153,163 )
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