MAGE-1与结核杆菌HSP70融合基因的构建及原核表达
陈广生
隋延仿
叶菁
张秀敏
宋宏萍
1.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100322.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100323.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100324.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100325.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710032
摘要：目的构建结核杆菌HSP70与肿瘤抗原MAGE-1的融合基因,在大肠杆菌中进行表达,并通过GST纯化系统进行分离纯化.方法利用PCR方法扩增TBHSP70基因,经测序后连入原核表达载体pGEX-4T-1,再通过PCR方法扩增MAGE-1基因片段(289～927bp),测序后插入TBHSP70基因的5'端,构建MAGE-1与TBHSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-MAGE-1-TBHSP70,含有该质粒的大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化.结果成功地扩增了TBHSP70基因与MAGE-1基因片段,测序结果表明与GenBank公布的序列一致;成功地构建了pGEX-MAGE-1-TBHSP70原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌DH5α经IPTG诱导后表达一Mr约为125 000的蛋白,经GST融合蛋白表达系统纯化,得到了MAGE-1与TBHSP70的融合蛋白.结论成功地获得了MAGE-1与TBHSP70的融合蛋白,为研究MAGE-1-TBHSP70融合蛋白在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础.
关键词：结核杆菌热休克蛋白70黑色素相关抗原-1融合基因原核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30271464)军队医药卫生科研项目(01Z084)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 342-344 )
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