成年大鼠胰岛的体外基因转染
金永柱
曲爱娟
谢蜀生
1.北京大学医学部免疫学系,北京,1000832.北京大学医学部免疫学系,北京,1000833.北京大学医学部免疫学系,北京,100083
摘要：目的探讨携带外源基因的慢病毒在体外有效感染胰岛及外源基因在胰岛中的表达,为通过移植前向胰岛细胞转入特定的免疫调节分子基因诱导胰岛移植物耐受奠定基础.方法将目的基因CTLA4Ig导入慢病毒载体pWPTS,构建成pWPTS-CTLA4Ig载体.用磷酸钙沉淀法将pWPTS-EGFP、pWPTS-CTLA4Ig分别和其辅助载体pMD2.G、pCMV△8.92共转染293T细胞,收获病毒上清液,测定病毒滴度后感染新分离的胰岛.通过Western Blot测定胰岛培养上清液中CTLA4Ig蛋白的表达.结果①成功构建了携带CTLA4Ig基因的慢病毒载体pWPTS-CTLA4Ig;②包装产生的慢病毒Lenti-EGFP、Lenti-CTLA4Ig在体外可以感染胰岛,其中在Lenti-EGFP慢病毒感染的胰岛观察到了绿色荧光,及在Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛培养上清液中检测到了CTLA4Ig蛋白的表达.结论慢病毒在体外可以有效感染大鼠胰岛,且携带的外源基因可以在胰岛细胞中稳定表达,其中Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛为进行胰岛移植并诱导体内特异的胰岛移植物耐受奠定了基础.
关键词：Ⅰ型糖尿病胰岛慢病毒载体基因治疗
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(39830340)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 345-348 )
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