视黄酸依赖反义cyclinD1 RNA表达载体的构建与鉴定
杨剑
糜漫天
杨志祥
韦娜
1.第三军医大学预防医学系营养卫生学教研室,重庆,4000382.第三军医大学预防医学系营养卫生学教研室,重庆,4000383.第三军医大学预防医学系营养卫生学教研室,重庆,4000384.第三军医大学预防医学系营养卫生学教研室,重庆,400038
摘要：目的构建人细胞周期素D1(CyclinD1)基因的视黄酸(Retinoic acid, RA)依赖反义RNA表达载体,为进一步在细胞内应用视黄酸诱导其表达从而发挥效应的肿瘤基因治疗奠定基础.方法运用DNA重组技术构建含有RARE3-TK启动子的反义cyclin D1 RNA真核表达载体(pCI-neo/RARE3-TK/AScyclin D1), 经酶切、PCR以及DNA测序确认后,用脂质体方法转染HL-60细胞(人早幼粒白血病细胞系),RA处理后,利用免疫组织化学方法检测细胞内靶基因cyclin D1的表达情况.结果成功构建重组反义cyclin D1 RNA表达载体,与预期设计路线相符;检测DNA序列与原始片段互补,且方向相反.ATRA处理转染和未转染HL-60细胞后,cyclin D1的表达均有所下降,其中转染组细胞的表达量要明显低于未转染组.结论本实验成功构建了视黄酸依赖反义cyclinD1 RNA表达载体;转染HL-60细胞后,反义cyclin D1的表达可受到RA的诱导调控.
关键词：CyclinD1视黄酸反义
分类号：R730.2(一般性问题)
资助基金：国家自然科学基金(30070328)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 20-23,26 )
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