MAGE-n的原核表达与分离纯化
黄亚渝
隋延仿
叶菁
董海龙
陈广生
张秀敏
1.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100322.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100323.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100324.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100325.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,7100326.第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710032
摘要：目的构建MAGE-n的原核表达质粒,在大肠杆菌中进行表达,并通过谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferse,GST)纯化系统进行分离纯化.方法用ANTHEPROT V5.0软件预测MAGE-n的生物学特性,从中选择抗原性及特异性较强的一段.利用PCR方法扩增MAGE-n基因片段,连入原核表达载体pGEX-4T-1,构建MAGE-n的原核表达质粒pGEX-MAGE-n并测序.将该质粒转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化.结果成功地扩增了MAGE-n基因片段,测序结果表明与GenBank公布的序列一致,成功地构建了pGEX-MAGE-n原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌经异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后表达一Mr约为43 000的蛋白,经GST融合蛋白纯化系统纯化,得到了MAGE-n的重组蛋白.结论首次获得了新的肿瘤抗原MAGE-n的重组蛋白,并进行分离纯化,为进一步研究MAGE-n抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础.
关键词：黑色素瘤抗原-n原核表达纯化重组蛋白
分类号：R735(消化系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30271464)军队医药卫生科研项目(01Z084)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 103-105,109 )
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