复合干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及活性分析
于长明
齐连权
来大志
张晓鹏
孔毅荣
于婷
付玲
陈薇
1.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000712.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000713.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000714.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000715.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000716.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000717.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,1000718.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京,100071
摘要：目的在毕赤酵母中高效分泌表达复合干扰素.方法根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素基因,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K,线性化后转化毕赤酵母GS115,筛选高表达菌株.诱导后的培养上清经过离子交换,疏水层析,凝胶过滤三步层析纯化,用细胞病变抑制法测定其活性,并结合lowry法蛋白定量计算其比活性.结果SDS-PAGE分析显示,重组蛋白以可溶性分子的形式存在于上清液中,经纯化后纯度达到96%,其N端氨基酸序列与理论值一致,比活与干复津相当.结论复合干扰素在毕赤酵母中获得高效分泌表达,为获得大量基因工程产品奠定了基础.
关键词：复合干扰素毕赤酵母基因表达
分类号：Q291(细胞生物学)Q786(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 113-116 )
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