一种高效表达和快速纯化重组人IL-10的原核载体系统
李明才
何韶衡
1.汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所,广东,汕头,5150412.汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所,广东,汕头,515041
摘要:目的探讨一种在大肠杆菌中高效表达和简单纯化重组人白细胞介素10(IL-10)的方法.方法构建重组人IL-10表达载体pBAD/Thio-TOPOR-ILl0,它编码1个Mr34 700融合蛋白即硫氧还蛋白-IL10.含表达质粒pBAD/Thio-TOPOR-ILl0的工程菌经阿拉伯糖诱导、37℃培养,上述融合蛋白得到表达,表达产物经固化Ni2+树脂亲和层析纯化,用肠激酶从融合蛋白中切下靶蛋白IL-10.结果硫氧还蛋白-ILl0融合蛋白在大肠杆菌中的表达效率达50%,并且可从细菌粗提物中一步纯化融合蛋白.结论它为大批量用细菌表达真核蛋白及纯化提供了一种快速简便而又切实可行的方法.
关键词:重组蛋白表达载体硫氧还蛋白白细胞介素-10
分类号:Q51(蛋白质)
论文发表日期:2004-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 140-143 )
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