布氏杆菌pCDNA3.1-L7/L12核酸疫苗的构建及其免疫学评价
曾政1
王英2
赵光宇2
周华2
于三科3
韩岳2
罗德炎2
马丽娟2
王希良2
1.军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071;西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨陵,7121002.军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,1000713.西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨陵,712100
摘要：目的获得布氏杆菌保护性抗原L7/L12重组蛋白及pCDNA3.1-L7/L12重组质粒,并比较其诱导特异性免疫应答的能力.方法 PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7/L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中;pET32a-L7/L12重组质粒转化BL21(DE3),所表达蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹分析、纯化后免疫小鼠;pCDNA3.1-L7/L12重组质粒配以GM-CSF同时肌肉注射免疫小鼠,3次免疫后测定免疫功能进行免疫效果的评价.结果 ELISA、Western blot 检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生,蛋白苗所诱导的抗体效价远远高于DNA 疫苗;通过淋巴细胞增殖实验、细胞因子和CD分子测定表明 DNA疫苗以诱发TH1型免疫为主.结论所构建的布氏杆菌DNA疫苗和蛋白苗均具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力, DNA疫苗诱导产生的细胞免疫反应强于蛋白苗,可作为潜在的布氏菌新型疫苗,有进一步研究的意义.
关键词：布氏杆菌L7/L12 蛋白DNA疫苗
分类号：R378.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30170853)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 208-212 )
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